Na coleta não cirúrgica de embriões bovinos é imprescindível os cuidados com a higiene para que não haja contaminação.
Antes da coleta não cirúrgica de embriões, procede-se à contenção da vaca por meio de um tronco, para evitar riscos de ferimento no bovino e no operador. Em seguida, aplica-se anestesia epidural, visando ao relaxamento do bovídeo, além do bloqueio dos movimentos retais e possíveis dores durante a passagem da sonda. É imprescindível a higiene do local, já que é um artifício para que não haja contaminação durante o processo.
Após oito dias da inseminação artificial os embriões dos bovídeos estarão prontos para a coleta. Isso piora as condições de manipulação, proteção e congelamento, pois a maioria passa a apresentar a zona pelúcida dos embriões rompida.
Uma sonda é introduzida na vagina da vaca, até que chegue ao como uterino onde o balão será inflado, iniciando o processo de lavagem. A coleta propriamente dita ocorre por meio da perfusão uterina com Meio Dubbeco Modificado (DPBS), a uma temperatura de 25°C, pH 7,2 e osmolaridade de 290 miliosmol.
Durante o processo, é feita uma conexão com o equipo ligando sonda, DPBS e filtro. A bolsa contendo DPBS é colocada em torno de um metro acima da doadora. A quantidade de DPBS depositada pode variar de 50 a 150 mL, porém o operador deve verificar o preenchimento uterino, pois o excesso pode levar a uma ruptura uterina.
A retirada do líquido é feita por massagem retrógrada, após fechar a presilha de entrada de meio, e abrir a saída que leva até o filtro. O excesso de DPBS no filtro deve ser removido sempre lembrando de deixar um pouco de DPBS no filtro. O controle do fluxo de PBS no interior do útero é feito por dois registros presentes no equipo.
Esses passos devem ser repetidos até que o DPBS acabe. Terminada a coleta, o conteúdo do filtro é colocado em uma placa de petri (100 mm), onde os embriões serão rastreados com auxílio de lupa estereomicroscópica.
Assim que localizados, os embriões são passados para uma placa de petri de menor tamanho (30 mm), contendo uma solução de manutenção de embriões, chamada Embryo Holding Solution.
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Por Andréa Oliveira.
Acesse os links abaixo e conheça mais sobre a transferência de embriões:
Aplicações da transferência de embriões em bovinos
A técnica da fertilização in vitro (FIV) e o cultivo de embriões bovinos
Classificação dos embriões bovinos quanto à morfologia
Transferência de embriões em bovinos
Transferência cirúrgica e não cirúrgica de embriões bovinos
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